Contenido
- Diferencia principal
- Manchado del sur vs. Western Blotting
- Cuadro comparativo
- ¿Qué es el Southern Blotting??
- ¿Qué es el Western Blotting??
- Diferencias clave
- Conclusión
Diferencia principal
La principal diferencia entre Southern Blotting y Western Blotting es que Southern Blotting es una técnica que se usa para detectar un fragmento de ADN específico en una muestra dada, mientras que Western Blotting se usa para encontrar una proteína específica en una muestra dada.
Manchado del sur vs. Western Blotting
La transferencia es una técnica que utilizan los científicos para separar diferentes tipos de moléculas de una mezcla o muestra. En esta técnica, las macromoléculas como los ácidos nucleicos (ADN y ARN) y las proteínas en una mezcla se mueven a través de una losa de gel. Aquí, las partículas diminutas se moverán más rápido que las más grandes. Estas moléculas se presionan contra la superficie de una membrana inmovilizada que transfiere las moléculas a la membrana. Existen diferentes tipos de transferencia en función de la detección de material específico, es decir, transferencia del sur, transferencia del norte y transferencia del oeste. La transferencia Southern es el tipo de transferencia que se usa para detectar ADN, mientras que la transferencia occidental se usa para descubrir proteínas. La transferencia Southern fue desarrollada por Edward M. Southern en 1975. Por lo tanto, se conoce como transferencia Southern. Por otro lado, la transferencia de Western fue desarrollada por el grupo de George Stark en la Universidad de Stanford en 1979. Este nombre se usó para combinar con la transferencia de Southern. La transferencia Southern se usa para encontrar una secuencia de ADN específica, mientras que la transferencia Western se usa para encontrar una secuencia específica de aminoácidos o proteínas.
Cuadro comparativo
| Manchado del sur | Western Blotting |
| Una técnica que se utiliza para descubrir una secuencia de ADN específica en una mezcla dada se conoce como transferencia Southern. | Una técnica que se utiliza para descubrir una secuencia de aminoácidos específica de la proteína en una mezcla dada se conoce como transferencia Southern. |
| Desarrollado por | |
| La transferencia Southern fue desarrollada por Edward M. Southern en 1975. | La transferencia Western fue desarrollada por el grupo de George Stark en la Universidad de Stanford en 1979. |
| Tipo de detección | |
| La transferencia Southern se usa para descubrir una secuencia de ADN específica. | La transferencia Western se usa para descubrir una secuencia específica de aminoácidos o proteínas. |
| Principio | |
| Funciona según el principio de hibridación. | Funciona según el principio del método de inmunodetección o la interacción antígeno-anticuerpo. |
| Onda o exploración. Examinar o explorar algo usando las manos o instrumentos | |
| Se usa un ADN monocatenario o, a veces, ARN como sonda. | Los anticuerpos primarios y secundarios se usan como sonda. |
| Electroforesis en gel | |
| La electroforesis en gel de agarosa se usa en la transferencia Southern. | PÁGINA SDS / Gel de poliacrilamida utilizado para separar proteínas en la transferencia Western |
| Procedimiento de borrado | |
| La transferencia Southern sigue el procedimiento de transferencia capilar. | Western Blotting sigue el procedimiento de transferencia eléctrica. |
| Muestra | |
| Durante la transferencia Southern, la muestra necesita ser desnaturalizada. | Durante la transferencia Western, la muestra debe estar en su estado nativo. |
| Bloqueo | |
| Ningún paso como el bloqueo está involucrado en la transferencia del sur. | Durante la transferencia Western, los sitios de anticuerpos inespecíficos se bloquean en el papel de nitrocelulosa con la ayuda de leche en polvo o albúmina de suero bovino (BSA). |
| Métodos de etiquetado | |
| Los métodos comunes de etiquetado que se usan en la transferencia Southern son el uso de colorantes cromogénicos o radiomarcado o etiquetado fluorescente, etc. | Los métodos de marcado utilizados en la transferencia Western son el uso de anticuerpos marcados con fluorescencia o radiomarcaje, tintes cromogénicos o formación de diaminobencidina, etc. |
| Métodos de detección | |
| La detección de luz, la autorradiografía y los cambios de color se utilizan como métodos de detección en la transferencia Southern. | Los métodos de detección en la transferencia Western son cambios de color y detección de luz, etc. |
| Solicitud | |
| La transferencia Southern se utiliza en la detección de ADN, las pruebas de paternidad, la digitación de ADN, la identificación de víctimas, la identificación de delincuentes, la búsqueda de agentes infecciosos y la identificación de mutaciones o reordenamiento genético, etc. | La transferencia Western se usa para encontrar el número de proteínas en una mezcla, para detectar la presencia de VIH, virus y bacterias, etc. en el suero, para encontrar proteínas defectuosas y se usa como una medida definitiva para el herpes, la hepatitis B, Lyme enfermedad y enfermedad de Creutzfeldt-Jacob, etc. |
¿Qué es el Southern Blotting??
La transferencia Southern es el método de transferencia más antiguo dado por Edwin Southern, denominado así como transferencia Southern. Se utiliza para descubrir una secuencia específica de ADN en una muestra o mezcla dada. Los pasos involucrados durante la transferencia Southern son la electroforesis, la transferencia y la detección de secuencias específicas. En primer lugar, el ADN se fragmenta con la ayuda de una enzima de restricción específica. Luego, los fragmentos de ADN deseados se separan mediante electroforesis en gel. Estos fragmentos se desnaturalizan con la ayuda de una solución alcalina, por ejemplo, NaOH, etc. para separar las dos cadenas de ADN. Estos fragmentos de ADN monocatenarios luego se transfieren a una membrana a través del proceso de transferencia. Este ADN unido a la membrana se trata con una sonda marcada. Esta sonda se unirá a su cadena complementaria en el ADN de la membrana que puede visualizarse mediante autorradiograma, etc.
¿Qué es el Western Blotting??
El método de transferencia Western fue inventado por el grupo de George Stark en la Universidad de Stanford que se utiliza para identificar una secuencia específica de aminoácidos en la proteína. También se conoce como transferencia de proteínas o inmunotransferencia. Los pasos durante la transferencia Western son la electroforesis, la transferencia y la detección de proteínas específicas. En primer lugar, homogeneizar la mezcla. Luego separe la molécula de interés con la ayuda de la electroforesis. Transfiera estas moléculas a la membrana e identifique la proteína específica utilizando una sonda específica.
Diferencias clave
- Una técnica que se usa para descubrir una secuencia de ADN específica en una mezcla dada se conoce como transferencia Southern, mientras que una técnica que se usa para descubrir una secuencia de aminoácidos específica de la proteína en una mezcla dada se conoce como transferencia Southern.
- La transferencia Southern fue desarrollada por Edward M. Southern en 1975, así conocida como transferencia Southern. Por otro lado, el blotting occidental fue desarrollado por el grupo de George Stark en la Universidad de Stanford en 1979.
- La transferencia Southern se usa para descubrir una secuencia de ADN específica. Por el contrario, la transferencia Western se usa para descubrir una secuencia específica de aminoácidos o proteínas.
- La transferencia Southern funciona según el principio de hibridación por otro lado; La transferencia Western funciona según el principio del método de inmunodetección o la interacción antígeno-anticuerpo.
- Un ADN monocatenario o, a veces, ARN se usa como sonda en la transferencia Southern en el otro lado, en la transferencia occidental, los anticuerpos primarios y secundarios se usan como sonda.
- La electroforesis en gel de agarosa se usa en la transferencia Southern mientras que la SDS PAGE / Gel de poliacrilamida se usa para separar las proteínas en la transferencia Western.
- La transferencia Southern sigue el procedimiento de transferencia capilar, por otro lado; Western Blotting sigue el procedimiento de transferencia eléctrica.
- Durante la transferencia Southern, la muestra necesita ser desnaturalizada, mientras que, durante la transferencia Western, la muestra debe estar en su estado nativo.
- Ningún paso como el bloqueo está involucrado en la transferencia Southern en la otra cara, durante la transferencia Western, los sitios de anticuerpos inespecíficos se bloquean en el papel de nitrocelulosa con la ayuda de leche en polvo o albúmina de suero bovino (BSA).
- Los métodos de etiquetado comunes que se usan en la transferencia Southern son el uso de colorantes cromogénicos o radiomarcado o etiquetado fluorescente, etc.
- La detección de luz, la autorradiografía y los cambios de color se utilizan como métodos de detección en la transferencia Southern, mientras que los métodos de detección en la transferencia occidental son cambios de color y detección de luz, etc.
- La transferencia Southern se usa en la detección de ADN, pruebas de paternidad, digitación de ADN, identificación de víctimas, identificación de delincuentes, búsqueda de agentes infecciosos e identificación de mutaciones o reordenamiento genético, etc. mezcla, para detectar la presencia de VIH, virus y bacterias, etc. en el suero, para descubrir proteínas defectuosas y se usa como una medida definitiva para el herpes, la hepatitis B, la enfermedad de Lyme y la enfermedad de Creutzfeldt-Jacob, etc.
Conclusión
La discusión anterior resume que la transferencia Southern es la técnica de transferencia más antigua utilizada para descubrir un segmento de ADN específico en una muestra, mientras que la transferencia Western se descubrió más tarde y se usó para identificar una secuencia específica de aminoácidos o una proteína específica.
